高速液体クロマトグラフィー(HPLC)を用いたFDNB-有効性リジンの一定量法
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概要
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高速液体クロマトグラフィー(HPLC)を用いる全有効性リジン(Av-Lys=リジン残基,N末端リジン,遊離リジン)の測定法について検討し,以下の結果を得た。1 Capenter法により得られるε-ジニトロフェニール(DNP)-リジン(Lys)とdi-DNP-LysをHPLCを用いて定量するための前処理方法として,ε-DNP-Lysの遊離アミノ基を,クロルギ酸n-ブチルを用いて,n-ブトキシカルボニル化し,極性を低下させた。これにより,di-DNP-Lysの近くに溶出させることができた。2 内部標準物質として,2, 4-ジニトロジフェニルアミン(DDA)が良いことがわかった。3 カラムおよび,溶離液組成を検討した結果,ラジアルパックカートリッジC/18 10μm, 5mmid x 100mmを用い,溶離液のアセトニトリル濃度を段階的に増して行くステップ溶出法により,10分以内に目的物の分離定量を行なうことができた。10回のくり返し分析の結果,変動係数は,1.23%以下であり,分離定量に問題はないと考えられた。終りに,多大な御協力をいただいた谷丸恵美子氏,秋田昌子氏に感謝いたします。また,本研究に使用した費用の一部は,昭和55年度,文部省科学研究費,(試験研究2)によった,記して謝意を表する。また,本報の大要は昭和56年度日本農芸化学会で発表した。
- 東京家政学院大学の論文
- 1984-12-25
著者
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