DEAE-セルロースクロマトグラフィーによるレンネットの精製

概要

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レンネットをDEAE-セルロースカラムに吸着させ, 0.1M燐酸緩衝液(pH 5.7)に0.1, 0.2および0.3M NaClを加えて調製した溶出液および0.1N HClで順次溶出させてレンニンを分離精製し,あわせてレンネット中に混在するペプシンをも分離し,その活性割合を測定した. (1) 0.1M燐酸緩衝液(pH 5.7)に添加するNaClの濃度を0.1Mから0.2Mに増加した溶出液で得られるFraction 3に凝乳力カが存在し, pH 6.62,イオン強度0.2の燐酸緩衝液を用いた電気泳動,沈降分析からみて均一性の高いレンニンが得られた. (2) 0.1N HClで溶出されるFraction 5には酸性における分解力のpH依存性,およびペプシンのクロマトグラフィーとの比較からペプシンが存在すると考えられる.このペプシン区分の凝乳力, pH 5.6における分解力は,分割前のレンネット活性の1〜2%である.また,この程度のペプシンの存在は,レンネットのカゼイン分解による非カゼイン態および非蛋白態Nの増加には影響しないことが確められた.
社団法人日本農芸化学会の論文