Lactobacillus属乳酸菌での蛍光タンパク発現ベクター系の構築とその応用(研究科分,平成15年度麻布大学公的研究助成金事業研究成果報告)
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概要
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乳酸菌のプロバイオティクス性を示す指標の一つとして腸管上皮細胞への付着性があげられる。乳酸菌に蛍光タンパク質遺伝子を発現させ,産生されたタンパク質の蛍光をマーカーとすることを試みた。まずE. coliのプロモーターに連結された蛍光タンパク質遺伝子(pECFP, pEYFP)を乳酸菌で発現させるために,pIL253をベースに乳酸菌用プロモーター領域およびE. coli用oriを組み込んだシャトルベクターpKTを作成した。次に蛍光タンパク質遺伝子ECFPとEYFPをそれぞれpKTに組み込んだpKTCFPおよびpKTYFPを作成し,Lactobacillus reuteriを形質転換した。その結果,pKTCFPによる形質転換体で蛍光タンパク質が産生され,蓄積された蛍光タンパク質により発光するL. reuteriの形質転換体を得ることができた。黄色の蛍光タンパク質に関しては,pKTYFPよりpH抵抗性の高いpKTEYFP-L68V/Q69Kを構築し,一般の培養でも黄色の蛍光色を発するL. reuteriの形質転換体の獲得に成功した。
- 麻布大学の論文
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