ショウガ・プロテアーゼの精製と安定化(B. 生活科学)
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概要
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ショウガの根に含まれる蛋白質加水分解酵素をアセトン処理, りん酸緩衝液抽出, CM-セルロースクロマトグラフィー, Bio-Gel P-100によるゲルクロマトグラフィーなどの処理により高純度に精製した.この際プロテアーゼの自己消化防止剤(安定化剤)として, HgCl_2とPCMBの水銀剤を使用しその効果を比較検討したが, HgCl_2を反応させScheme 1の方法で精製した酵素は, 二量体の酵素が生成していて, Bio-Gel P-100のクロマトグラム上で高分子の不純物と重り合った.PCMBで安定化した酵素をCM-セルロースクロマトグラフィーおよびBio-Gel P-100のゲルクロマトグラフィーにかけて得た標品は最も比活性も大きく純度の高いものであった.この標品は安定化剤を使用しないで精製し得られた標品の約6倍活性の強いものであった.またこの精製プロテアーゼのBio-Gel P-100による分子量の測定によると, 2万9千であって, この値はSDS-スラブ-ポリアクリルアミドゲル電気泳動によって求めた前回の実験値とよく一致した.
- 京都府立大学の論文
- 1978-11-30
著者
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