λファージ<I>p<SUB>R</SUB>p<SUB>L</SUB></I>プロモーターを利用した組換え大腸菌の高濃度培養による効率的な遺伝子産物の生産
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概要
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我々はλファージ<I>p<SUB>R</SUB>p<SUB>L</SUB></I>タンデムプロモーターの制御下に, モデル遺伝子産物として大腸菌由来のガラクトキナーゼ遺伝子が発現する組換えプラスミドpRLK14を有する大腸菌を, ジャーファーメンターで高濃度培養した.このプラスミドは, 同時に温度感受性のλファージ<I>cI</I>857リプレッサー遺伝子を含んでいるので培養温度により遺伝子発現を制御できる.高濃度培養と効率的な遺伝子産物生産の条件を決定するため, この菌を30〜42℃の間の種々の温度でジャーファーメンターにより培養した.この結果, 30℃ではモデル遺伝子産物であるガラクトキナーゼの生産が抑制され, 42℃では最も効率的に生産が誘導されることを確認した.培養温度を培養途中で変化させ, 遺伝子産物の生産を誘導する二段階培養を試みたところ, 最初34℃で培養を行い, 続いて菌体濃度が21kg乾燥菌体/m<SUP>3</SUP>の時に42℃に培養温度を変化させると最も効率的な生産が可能であった.
著者
-
川瀬 優治
日本ガイシ
-
飯島 信司
名古屋大学
-
大嶋 孝之
名大・工・生物機能工
-
小林 猛
名古屋大学
-
室岡 義勝
広島大学工学部
-
大嶋 孝之
名古屋大学工学部 生物機能工学科
-
張 小里
中華人民共和国西北大学化工系
-
張 小里
中華人民共和国西北大学 化工系
-
室岡 義勝
広島大学工学部 醗酵工学科
-
川瀬 優治
日本ガイシ (株)
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