酵母<I>PGK</I>プロモーターからの遺伝子発現制御による有用物質の効率的生産
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概要
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酵母ホスホグリセレートキナーゼ遺伝子 (<I>PGK</I>) のプロモーター領域にマウスα-アミラーゼ遺伝子を連結した組換えプラスミドを持つ酵母を培養し, 効率的な遺伝子産物の生産条件について検討した.まず試験管レベルの培養でいろいろな培地を検討した結果, 硫安が遺伝子産物の生産を抑制することがわかった.一方, 硫安の代わりに酵母エキスを窒素源として用いると遺伝子産物の生産が促進され, しかも, 生産レベルは酵母エキスの濃度に依存し, 10kg/m<SUP>3</SUP>以上の濃度の酵母エキスが遺伝子産物の生産に最適であった.そこでジャーファーメンターでの培養において, 窒素源として酵母エキスを含んだ培地を用い, オンライングルコースアナライザーによりグルコース濃度を測定, 制御して培養した.その結果, グルコース濃度が菌の増殖と遺伝子発現に強く影響することが判明した.最終菌体濃度と遺伝子の発現はグルコース濃度が低いほどよく, グルコース濃度を0.15kg/m<SUP>3</SUP>に制御することによって2830μkat/m<SUP>3</SUP>のマウスα-アミラーゼが生産され, 培地に分泌された.これはグルコース濃度を10kg/m<SUP>3</SUP>に制御したときの10倍であった.
- 社団法人 化学工学会の論文
著者
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小林 猛
名古屋大学大学院工学研究科
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飯島 信司
名古屋大学工学部
-
菱沼 文男
三菱化成生命科学研究所
-
飯島 信司
名古屋大学
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小林 猛
名古屋大学
-
林 孔華
名大・工・生物機能工学
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林 孔華
名古屋大学工学部 生物機能工学科
-
黄 世佑
台湾大学 化学工程学系
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