遺伝子組換えコメの定性検知に用いる陽性コントロールプラスミド(pBT63)の開発
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概要
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遺伝子組換え(GM)作物の検知法では、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)の標的配列を保持するプラスミドDNAが陽性コントロールとして広く用いられている。プラスミドDNAのコンタミネーションによる偽陽性反応を排除するため、我々は標的配列中に制限酵素(BamH I)認識部位を含むように設計した定性PCR検知用の陽性コントロールを開発した。PCR産物へのBamH Iの直接添加で、GM米系統Shanyou63 (Bt63米)検知用のプラスミド(pBT63)を鋳型に用いた増幅断片は切断されるが、Bt63米のゲノムDNAを鋳型として用いた増幅断片は切断されなかった。これらの結果から、pBT63と同様の機能を有するプラスミドを陽性コントロールとして用いることで、陽性コントロールのコンタミネーションによる偽陽性を容易に識別することが可能となり、定性PCR法による検知法の判定に対する信頼性の向上に貢献出来ることが示された。
- 2014-04-25
著者
-
穐山 浩
国立医薬品食品衛生研究所
-
中村 公亮
国立医薬品食品衛生研究所
-
近藤 一成
国立医薬品食品衛生研究所
-
真野 潤一
独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構食品総合研究所
-
加藤 康夫
富山県立大・工・生物工学研究センター
-
穐山 浩
国立医薬品食品衛生研究所食品部
-
峯岸 恭孝
株式会社ニッポンジーン
-
高畠 令王奈
独立行政法人 農業・食品産業技術総合研究機構食品総合研究所
-
橘田 和美
独立行政法人 農業・食品産業技術総合研究機構 食品総合研究所
-
峯岸 恭孝
株式会社ニッポンジーン:富山県立大学大学院生物工学専攻
-
高畠 令王奈
独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構食品総合研究所
-
高畠 令王奈
独立行政法人 農業・食品産業技術総合研究機構 食品総合研究所
-
真野 潤一
独立行政法人 農業・食品産業技術総合研究機構食品総合研究所
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