プライマー伸長反応を使用した遺伝子組換え大豆の発色定量法
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概要
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プライマー伸長反応を利用して遺伝子組換え(GM)大豆の短時間で簡便な発色定量法を開発した。この方法では、GM大豆(ラウンドアップレディー大豆(RRS))の特異的DNA配列に対して、それに対応するオリゴを固定したプレート上で、DNAポリメラーゼにて伸長反応を行い、その際にビオチン11-dUTPを取り込ませ、そのビオチンをアビジン-ビオチン複合体とアルカリフォスファターゼで発色させた。その結果、PCR産物を精製して作成したRRS特異的配列DNA断片を10^9コピーから検出でき、10^<10>-10^<12>コピーの間ではコピー数の対数と発色の濃さの間に高い相関が得られた。更に、0.1-5%GM大豆の抽出DNAからのPCRサンプルで検討した結果、大豆含量の対数と発色の濃さの間に相関を得ることができた。
- 2010-08-23
著者
-
橘田 和美
独立行政法人農業・食品産業技術研究機構食品総合研究所
-
穐山 浩
国立医薬品食品衛生研究所代謝生化学部
-
手島 玲子
国立医薬品食品衛生研究所代謝生化学部
-
穐山 浩
国立医薬品食品衛生研究所
-
日野 明寛
国立医薬品食品衛生研究所
-
近藤 一成
国立医薬品食品衛生研究所
-
日野 明寛
九州大学 大学院 歯学研究院 口腔機能解析学 分野
-
手島 玲子
国立医薬品食品衛生研究所
-
手島 玲子
農業･食品産業技術総合研究機構食品総合研究所 食品分析研究領域
-
吉田 雄三
武庫川女子大・薬
-
吉田 雄三
武庫川女子大学薬学部
-
張替 直輝
武庫川女子大学薬学部
-
穐山 浩
アサヒビール
-
日野 明寛
アサヒビール
-
穐山 浩
国立医薬品食品衛生研究所食品部
-
手島 玲子
国立衛研・機能生化学
-
橘田 和美
(独)農業・食品産業技術総合研究機構 食品総合研究所
-
橘田 和美
独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構食品総合研究所
-
近藤 一成
国立医薬品食品衛生研究所代謝生化学部
-
手島 玲子
国立医薬品食品衛生研究所 食品添加物部
-
橘田 和美
独立行政法人 農業・食品産業技術総合研究機構 食品総合研究所
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