PCR法を用いたMecistocirrus digitatusのITS領域の遺伝子解析と牛糞便中の消化管内線虫卵の識別への応用(寄生虫病学)
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概要
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Mecistocirrus digitatus感染の鑑別診断は,糞便中の虫卵もしくは培養によって識別したL3の形態学的検査により行われている.それら検査には技術的な限界がある.したがって,M. digitatusにおける特異的な診断方法を開発するため,rDNAのITS領域の配列を決定し,他の一般的な消化管内線虫種とM. digitatusを区別するための種特異的な増幅を示すプライマーを設計した.新たに設計したプライマーはM. digitatusから単一の520bpの断片を増幅した.またプライマーの検出限界は0.001ngであった.さらにM. digitatusメスの子宮から直接取り出した単一細胞の虫卵からでも特異的な断片の増幅が可能であった.この検出により,カバーガラスと小さい濾紙を用いて単一細胞の虫卵からPCR断片を特異的に増幅することが可能な方法を確立した.また,ショ糖浮遊法により牛糞便より回収した10個の虫卵サンプルにより特異的PCR法の信頼性が示された.これらのデータから,M. digitatusのITS領域を基にした特異的PCR法は消化管内線虫の識別に有用であることが示唆された.
- 社団法人日本獣医学会の論文
- 2006-04-25
著者
-
大沼 学
国立環境研究所
-
福本 真一郎
酪農学園大学獣医学部獣医寄生虫学教室
-
遠藤 大二
酪農学園大学獣医内科学放射線獣医学教室
-
望月 里衣子
酪農学園大学獣医学部
-
大沼 学
京都大学霊長類研究所人類進化モデル研究センター
-
大沼 学
(独)国立環境研究所
-
大沼 学
(独)国立環境研究所環境研究基盤技術ラボラトリー環境生物資源研究室
-
遠藤 大二
酪農学園大学獣医学部生体機能教育群
-
遠藤 大二
酪農学園大学 放射線
-
福本 真一郎
長崎県･nosai県北東彼地区家畜診療所
-
福本 真一郎
酪農学園大学獣医学部
-
福本 真一郎
酪農学園大学 獣医学部獣医寄生虫学
-
福本 真一郎
酪農学園大学獣医学科獣医寄生虫学教室
-
大沼 学
独立行政法人国立環境研究所環境研究基盤技術ラボラトリー生物資源研究室
-
遠藤 大二
酪農学園大 獣医
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