固定化菌体をもちいるりん酸転移反応によるグルコースりん酸の調製
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概要
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りん酸転移活性を有する酸性フォスファターゼを菌体内酵素としてもつ Escherichia freundii K-1 の洗浄菌体をポリアクリルアミドゲルに固定化することによって種々のりん酸エステル調製することを目的とした. 本報では, グルコースおよび p-nitrophenyl phosphate(p-NPP) をそれぞれりん酸基受容体および供与体としてもちいた. 固定化菌体のカラムをDowex(Cl-)カラムの上につなぎ反応液を直接吸着させた. Dowex カラムの溶出液より反応生成物を単離同定した結果, グルコース-6-りん酸700mg(Ba塩として), グルコース-1-りん酸60mg(K塩として)が得られた. 反応にもちいたp-NPPの約30%の収率であった. 固定化菌体のフォスファターゼ活性の性質を洗浄菌体と比較したところ, 至適pHおよび金属イオン, 阻害剤に対する挙動においては差異が認められなかった. 温度については, 至適温度の変動はなかったが, 熱安定性は固定化することによって増加した. 固定化菌体のカラムを長期間使用するこによって, その安定性を検討したところ, 30日間で43%の活性が失われたが以後120日目迄, ほぼ同程度の活性が持続された. したがって本カラムを長期間さらには基質を変えて使用することも可能であると考えられる.
- 1975-06-25
著者
-
谷 吉樹
京都学園大学バイオ環境学部バイオサイエンス学科
-
谷 吉樹
京都大学農学部農芸化学科
-
緒方 浩一
京都大学農学部農芸化学科
-
Saif Saif-ur-Rehman
京都大学農学部農芸化学科
-
谷 吉樹
京都大学農学部
-
緒方 浩一
京都大学農学部
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