β-フェネチルアルコール高生産酵母の分子育種
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概要
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A β-(2-Thienyl)-DL-alanine(THA)-resistant mutant of the yeast Saccharomyces cerevisiae, K901-T12,which overproduces β-phenetyl alcohol, was isolated from a fermentation strain, K901. The plasmids pAF1 and pAF2,containing 5.5 kbp and 6.0 kbp insert fragments, which confer THA resistance and high productivity of β-phenetyl alcohol, were cloned from the gene libraries constructed with the DNAs of K901-T12 on YCp and YEp vectors. The cells of sake brewing strains containing pAF1 exhibited high β-phenetyl alcohol productivity. According to the nucleotide sequence of the 2.1 kbp PmaCI fragment of the insert DNA, the cloned gene was almost identical to the ARO4 gene encoding 3-deoxy-D-arabino-hep-turosonate-7-phosphanate synthetase that could be regulated by tyrosine. C, the 584th nucleotide, in the wild-type ARO4 gene was substituted for T in the mutant gene, resulting in the conversion of ^195Ser into ^195Phe. Strains producing a large amount of β-phenetyl alcohol were also obtained by homologous recombination of the ARO4 gene to introduce the THA-resistant mutation. The YCp-and YEp-type shuttle vectors, which have the gene containing THA-resistant mutation as a selection marker, were constructed. A vector for homologous recombination was also constructed to introduce the foreign DNA fragment downstream of the ARO4 locus.
- 社団法人日本生物工学会の論文
- 1994-03-25
著者
-
蟻川 幸彦
長野県工業技術総合センター 食品技術部門
-
藤田 篤
工技院・生命研
-
馬場 茂
長野食工試
-
蟻川 幸彦
長野県食品工業試験場
-
藤田 篤
生命工学工業技術研究所
-
馬場 茂
長野県食品工業試験場
-
小栗 勇
長野県食品工業試験場
-
小栗 勇
長野県食品工試
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