体外受精および活性化処理されたウシ卵細胞質内カルシウムイオンの動態
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概要
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本研究はウシ体外成熟卵を用いて体外受精および活性化処理後の卵細胞質内カルシウムイオン濃度([Ca2+]i)の動態を比較する目的で検討した．さらに直流パルスと化学的な活性化法を併用した場合の卵細胞質内[Ca2+]iも測定した．体外受精用の卵子は，体外成熟培養21時間目に透明帯除去後，細胞膜透過性のカルシウム感受性蛍光指示薬indo-1/AM(20μM)を含む培養液中で40分間培養し，indo-1を取り込ませた．活性化処理は，体外成熟培養23時間目に卵丘細胞除去後，受精時と同じように蛍光指示薬を取り込ませた．用いた活性化処理法は7%エタノール，5μM Caイオノフォア(A-23187)，直流パルス(100V/mm，90μsec)である．体外受精卵では，精子付着直後に付着部位付近から[Ca2+]iが上昇しはじめ， Ca2+波様に卵細胞質全体に伝播した．しかし，今回の測定時間内(5分間)では一過性の[Ca2+]i上昇のみで， Ca2+オッシレーションは観察されなかった．エタノールとCaイオノフォアでは[Ca2+]iのピークが受精時よりも有意(P<0.05)に高く，さらにCaイオノフォアでは短い一過性の上昇とそれに続く持続的上昇の二相性を示した．一方，直流パルスによる[Ca2+]i動態は，上昇速度が速いことを除けば受精時のパターンに比べ有意差はなかった．また，直流パルスと化学的活性化法を組み合わせることによって[Ca2+]iは上昇した．以上の結果より，精子刺激と3種の活性化処理時の[Ca2+]i動態のパターンが異なること,3種の活性化処理の中では直流パルスによるものが受精時の場合に最も近い[Ca2+]iパターンであった．
- 日本繁殖生物学会の論文
著者
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福井 豊
帯広畜産大学 家畜育種増殖学講座
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白川 英樹
東京女子医大・医・第二生理
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宮本 明夫
帯広畜産大学畜産学部
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鄭 然吉
帯広畜産大学家畜育種増殖学講座
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李 殷松
帯広畜産大学家畜育種増殖学講座
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新庄 明
帯広畜産大学
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