ウシ卵胞卵子の体外成熟に及ぼす種々の要因に関する研究

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ウシ卵胞卵子(第一次卵母細胞)の体外成熟に及ぼす種々の要因に関して5つの実験を行なった。直径2〜5mmの卵胞から採取された卵子をHam F-12を基礎培地とする培養液で28時間培養した。実験1では,3種の培養方法(A法:5〜10個の卵子を1mlの培養液が入った小試験管に5%CO_2 in airを1分間注入し,ふ卵器内で培養,B法:同小試験管を37℃の振とう恒水槽に設置し,5%CO_2 in airを常時通気して培養,C法:同小試験管を5%CO_2 in airに調整した炭酸ガス培養装置内で培養)を用いた。3種の方法による体外成熟率に有意差は認められなかった(実験1および2)が,方法3で最高の成熟率(60.6%)が得られた。実験2,3では,培養前の卵子の生存性を検討するため,0.2%トリパンブルー染色(2分間)を行なった。染色卵子の成熟率(7.5〜8.0%)は不染卵子のそれ(37.8〜60.6%)と比べて有意に(P<0.01)低かった。しかし,不染卵子のみと染色を行なわないで培養した卵子の成熟率(49.6%,53.7%)に有意差が認められなかった(実験3)ことから,不染(生存)卵子と判定された卵子は同染色により何らかの悪影響を受けたものと思われた。実験4,5では,培養後の卵子成熟度を判定するために卵丘細胞層の膨潤化(実験4)と伸長度(実験5)について検討した。両実験結果より,卵丘細胞層の膨潤化の程度が大きく("++"以上),伸長度が<5mmの卵子の成熟率はそれ以下のものより高かった。よって,卵丘細胞層の膨潤化と伸長度は培養後の卵子が成熟しているか否かを判定する指標になるものと考えられた。
帯広畜産大学の論文
1986-11-30

ウシ卵胞卵子の体外成熟に及ぼす種々の要因に関する研究

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