Aspergillus niger No.12株の細胞内エキソおよびエンド型イヌリナーゼの精製と性質
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概要
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Exo- and endoinulinases were extracted from mycelia of Aspergillus niger strain 12 using quartz sand and purified by DEAE-Cellulofine A-500, Sephadex G-1OO, and Sephadex G-200 chromatographies. The intracellular enzymes were homogeneous as judged by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The purified exoinulinase P-Ⅱ had specific activities of 6.6 U/mg toward inulin and 22 U/mg toward sucrose. The endoinulinase P-Ⅲ showed 108 U/mg toward inulin, but no activity toward sucrose. Mrs of exoinulinase P-Ⅱ and endoinulinase P-Ⅲ were determined by gel filtration using Sephadex G-200 as 47 and 56 kDa, respectively. Optimal pH and temperature for enzyme activity were pH-5.0 and 55 ℃ for P-Ⅱ, and pH 5.3 and 45℃ for P-Ⅲ. Both the enzymes were activated by Mn2+ , and inactivated by Ag+, Hg2+, or p-chloromercuribenzoate. Inulinases P-Ⅱ and P-Ⅲ exhibited apparent Km values of 5.8 and 0.80 mM, respectively.黒麹菌Aspergillus nigerNo.12株の培養菌体を石英砂で破砕し,その抽出液から細胞内エキソおよびエンド型イヌリナーゼをDEAE-セルロファインA-500,続いてセファデックスG-100およびG-200クロマトグラフィーによりそれぞれ電気泳動的に単一に精製した。エキソ型イヌリナーゼP-IIの比活性は,イヌリンに対して6.6U/mg,ショ糖に対して22U/mgであった。エンド型イヌリナーゼP-Ⅲはイヌリンのみに作用し,比活性は108U/mgであった。ゲルろ過で測定した分子量は,エキゾ型イヌリナーゼP-Ⅱが47kDa,エンド型イヌリナーゼP-Ⅲが56kDaであった。エキソ型イヌリナーゼP-Ⅱとエンド型イヌリナーゼP-Ⅲの最適pHはそれぞれpH5.0とpH5.3,最適温度はそれぞれ55℃と45℃であった。両酵素ともMn2＋で賦活化され,Ag+,Hg2＋,p-クロロメルクリ安息香酸で失活した。エキソ型イヌリナーゼP-Ⅱとエンド型イヌリナーゼP-Ⅲのイヌリンに対するMichaelis定数(Km)は,それぞれ5.8mMと0.80mMであった。
- 宮崎大学の論文
著者
-
秋元 秀俊
宮崎大学農学部応用生物科学科
-
太田 一良
Department Of Biochemistry And Applied Biosciences Faculty Of Agriculture University Of Miyazaki
-
Ohta K
Nihon Tokushu Noyaku Seizo K.k. Tokyo Jpn
-
Ohta Kazuyoshi
Department Of Biochemistry And Applied Biosciences Faculty Of Agriculture Miyazaki University
-
太田 一良
宮崎大学農学部応用生物科学科
-
中村 豊彦
宮崎大学農学部応用生物科学科
-
倉盛 宏一
宮崎大学農学部応用生物科学科
-
在田 典弘
宮崎大学農学部応用生物科学科
-
Ohta K
Department Of Agricultural Chemistry Faculty Of Agriculture Kyushu University
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