担子菌の産生するアスパラギン結合型糖鎖遊離酵素系(糖質関連酵素化学シンポジウム)
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概要
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エンド-β-N-アセチルグルコサミニダーゼ(ENGase)とぺプチドN-グリカナーゼ(PNGase)は,in vivoでのアスパラギン結合(N)型糖鎖の動態を知る上で重要である。また,糖鎖解析やN型糖鎖配糖体合成に不可欠である。われわれは,多くの担子菌からENGase活性を検出し,Flammulina velutipes由来酵素エンドFVを精製した。本酵素は,N型糖鎖のハイマンノース型によく作用し,コンプレックス型には作用しなかった。また,糖鎖転移活性を示した。エンドFVはGHファミリー18酵素で,一次構造はクラスIIIキチナーゼと最もよく似ていたが,予測三次構造は,Streptomyces plicatus由来エンドHと似ていた。一方,大腸菌,酵母および麹菌でのエンドFVの発現系を構築し,発現系によって特異性が異なっていた。さらに,Agaricus bisporus由来エンドABを精製した。エンドABは,分子量や特異性がエンドFVと異なっていた。また,糖タンパク質から糖鎖を遊離し,GHファミリー85に属すると考えられた。一方,担子菌でのPNGaseの存在は限定的で,Hypsizigus marmoreus由来PNGase HMは広くN型糖鎖に作用し,F. velutipes由来PNGase FVはFuc結合糖鎖特異的な新規酵素であった。後者には特異性の異なる2つの酵素が存在した。また,担子菌のPNGaseは他起源のものとは異なるファミリーに分類されることが示唆された。
- 日本応用糖質科学会の論文
- 2011-04-20
著者
-
秦 洋二
月桂冠(株)総合研究所
-
秦 洋二
月桂冠(株)
-
伊藤 和央
大阪市立大学大学院理学研究科
-
久田 博元
月桂冠株式会社総合研究所
-
濱口 祐
大阪市立大学大学院理学研究科
-
伊藤 司
大阪市立大学大学院理学研究科
-
井上 裕香子
大阪市立大学大学院理学研究科
-
篠原 かな子
大阪市立大学大学院理学研究科
-
谷脇 聡
大阪市立大学大学院理学研究科
-
海住 宜広
大阪市立大学大学院理学研究科
-
久田 博元
月桂冠(株)総合研究所
-
LIMPASENI Tipaporn
チュラロンコン大学理学部
-
PONGSAWASDI Piamsook
チュラロンコン大学理学部
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