絨毛癌由来細胞におけるhCGβ遺伝子転写調節配列に関する分子生物学的検討
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概要
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hCGβ遺伝子系におけるプロモーター等の転写調節配列について, われわれはmouse副腎由来のY1 Cellを用いて検討し, その成績をすでに報告した. 今回さらに, 新たな実験系を考案することにより, 本遺伝子の転写調節配列を, eutopicにhCGβを発現する絨毛癌由来の細胞系であるJAr Cellで同定することに成功した. すなわち, まず, hCGβ遣伝子上流配列を原核生物由来で真核細胞ゲノムには存在しない遣伝子であり, 上流に接続した転写調節配列の活性のマーカーとなるChloramphenicol Acetyl Transferase(CAT)遺伝子の上流に接続し, さらにneomycin耐性遣伝子をも併せ持つプラスミッドを作成した. これらのプラスミッドをステーブル・トランスフェクション法によりJAr Cellに導入し, 本プラスミッドを取込んだ細胞のみをneomycin耐性遣伝子をマーカーとして選別し, 分離されたクローン群におけるCAT遺伝子の発現を検討した. その結果, 各種の長さのhCGβ遣伝子上流部分を持つプラスミッドをトランスフェクトしたJAr CellにおけるCAT遣伝子の発現から, gene 5の基本的プロモーターはY1 Cellにおいて示されたと同様に, 転写開始点から78bp以内に存在することが確認され, さらにその上流にも他の転写調節配列の存在する可能性が示唆された. Y1 Cellにおいてプロモーター活性を認めなかつたgene 7の遺伝子上流配列にはJAr Cellにおいても転写調節活性を認めなかった.
- 1989-12-01
著者
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望月 眞人
神戸大学医学部産科婦人科学教室
-
望月 眞人
神戸大学医学部産婦人科
-
大谷 徹郎
神戸大学医学部産科婦人科学教室
-
ボイメ アービング
ワシントン大分子生物、薬理
-
大谷 徹郎
神戸大
-
ボイメ アービング
神戸大学医学部産婦人科学教室
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