アスパラガス不定胚の同調化と長期継代培養時における不定胚の安定性評価

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植物不定胚の同調化は，その後の植物体への安定な再生を実現する上で重要である．本研究においては，アスパラガス(A. officinalis L.) ‘ウェルカム’ から誘導された不定胚の同調化手法の確立ならびに長期継代培養中における不定胚の形態および遺伝的安定性の評価を行った．不定胚の誘導については，ECの初期PCVに依存して，得られる不定胚のPCVが変化することがわかった．ECの初期PCVが1.0×10-2ml/100 ml-mediumのとき，誘導後42日後の不定胚PCVが43 ml/100 ml-mediumと最大に達した．このとき得られた不定胚をメッシュで分級したところ，心臓胚から魚雷胚へ移行する不定胚を多く含む画分が60.6％となり，不定胚誘導に適した条件であることがわかった．さらに，継代培養中の不定胚の投影面積ならびに円形度は，不定胚の生長過程を評価するパラメータとなりうることがわかった．誘導42日後の不定胚を用い，メッシュを組み合わせた分級収集を行ったところ，約90％の不定胚が平均投影面積1.0-4.0 mm2，円形度1.2-1.6の領域に含まれ，不定胚が同調化されていることが示された．しかし，さらに長期継代培養を続行したところ，誘導70日後において不健全な形態を示す不定胚の存在が認められた．誘導後42日後と70日後の不定胚から再生された植物体を対象にRAPD-PCR法により遺伝子解析を行ったところ，長期継代を経た一部の不定胚は遺伝子レベルで変質している可能性が示唆された．
日本生物環境工学会の論文
2008-09-01

アスパラガス不定胚の同調化と長期継代培養時における不定胚の安定性評価

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