アボカド (Persea americana) 果実の軟化に関係するβ-ガラクトシダーゼのクローニングと発現
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概要
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アボカド果実からβ-ガラクトシダーゼのcDNAクローン(AV-GAL)を単離した.DNAおよびアミノ酸配列は他の植物のβ-ガラクトシダーゼ遺伝子と70%程度の相同性を示した.予想されるタンパク質の分子量は85.8kDaであり, 766のアミノ酸からコードされていた.クローンから予想されるアミノ酸配列は, glycosyl hydrolase family 35に属するタンパク質が持っている活性サイトと考えられるG-G-P-[LIVM](2)-x(2)-Q-x-E-N-E-[FY](アミノ酸182-194)の配列を含み, また, システインとセリン残基(アミノ酸35-36)の間で切断されるシグナルペプチドと予想される部分が存在した.サザンハイブリダイゼーションによって, β-ガラクトシダーゼはsmall gene familyを形成し, また, AV-GALの3'-側部分から作成したAV-GAL-Cプローブは特異性が高いことが示された.ノーザンブロットでは, AV-GAL-Cプローブは単一の3.3kbのRNAとハイブリダイズした.収穫後4日目の果実で, 明らかなmRNAの蓄積がはじめて検出され, 収穫後7日目の果実では減少した.β-ガラクトシダーゼのmRNAの蓄積は, 果実の軟化, エチレン生成と時間的に一致していた.さらに, 果実の追熟に伴うmRNAの蓄積は, アボカド果実の軟化に関与していると考えられるβ-ガラクトシダーゼのアイソフォームであるAV-GAL III活性の変動と一致した.以上の結果から, AV-GALは, AV-GAL IIIをコードしていると考えられた.
- 園芸学会の論文
- 2002-01-15
著者
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