リンゴ各器官の内生アブシジン酸の酵素免疫分析法とガスクロマトグラフィーによる定量値の比較
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概要
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リンゴの茎, 葉, 果実に含まれるアブシジン酸 (ABA) 量が, エレクトロンキャプチャー検出器を備えたガスクロマトグラフィー (GLC-ECD), 及びモノクローナル抗体を用いた酵素免疫分析 (ELISA-MA) 法によって, 一致するかどうかを確かめた.遊離型と結合型ABAの定量のために, 各試料をメタノール抽出, 酢酸エチルによる分配, 薄層クロマトグラフィー (TLC) 分離などによって精製そしてメチル化後, GLC-ECDによって分離•定量したところ, 試料はABAの純品と一致する保持時間に明瞭なピークを示した. これらの明瞭なピークはガスクロマトグラフィー質量分析計 (GC-MS) による解析の結果, 主にABAから構成されることが確認された. 即ち, リンゴの各器官からの内生ABAはGLC-ECDによって定量的に分析できることが明らかになった.ELISA-MA法によりリンゴの各器官に含まれる内生ABA量を定量したところ, 上述のようにGLC-ECDによる分析試料と同じ前処理をした場合には, 各器官に含まれるABA量はGLC-ECDによる値と良く一致した. 茎や葉の場合にはいくつかの前処理の段階を省くことができた. さらに, モノクローナル抗体のABAに対する結合性は非常に高いので, 茎, 葉, 果実それぞれ50, 50,200μg新鮮重のレベルでABAの検知が可能である.以上より, ELISA-MA法による内生ABAの定量は, それぞれの試料に適した前処理法を行えば, 生体試料, 特にミクロ組織に含まれるABA量を定量出来る優れた方法であることが判明した.
- 園芸学会の論文
著者
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副島 淳一
農林水産省果樹試験場リンゴ支場
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山木 昭平
名古屋大学大学院生命農学研究科
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森口 卓哉
農林水産省果樹試験場
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渡辺 正子
農林水産省果樹試験場
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森口 卓哉
農林水産省•果樹試験場
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副島 淳一
農林水産省•果樹試験場
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