各種ウシ病原ウイルスに特異的なモノクローン抗体の作製
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概要
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ウシのアカバネ,流行熱,イバラキ等の各ウイルスに反応するMoAbを分泌するハイブリドーマの作製を試みた.まず感作Bリンパ球を得るための抗原としてのウイルスを生産するために,宿主細胞であるHmLu-1細胞の無血清培養を試みた.その結果SF-DF培地によって血清添加培地とほぼ同様の増殖が可能であることを見出した.さらに無血清培地中で培養されたHmLu-1細胞に対してウイルス感染が成立するのみならず,血清を含まないために純度の高いウイルス液がウイルスの失活を伴うことなく得られることが明らかとなった.次に,マウスミ***ーマP3U1細胞を親細胞としてPEG法によりハイブリドーマの作製を行った結果,アカバネウイルスOBE-1株に対して7種,ウシ流行熱ウイルスYHLに対して7種,イバラキウイルスNo. 2に対して3種の抗原に反応するMoAbが得られた.得られたMoAbのうち7種について,4種(アカバネウイルスOBE-1,ウシ流行熱ウイルスYHL,イバラキウイルスNo. 2,中山ウイルスK-47)のウシ病原ウイルスに対する交叉反応性を検討した結果, MoAb 1 A-4がアカバネウイルスOBE-1に対して,また, MoAb Y-1 E 6-8がウシ流行熱ウイルスYHLに対して特異的にしかも強く反応することが示唆された.
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