Bradyrhizobium japonicumカタラーゼ遺伝子のクローニング方法の確立
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概要
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Bradyrhizobium属の6菌株についてカタラーゼ活性を測定し,最も活性の高かったB. japonicum USDA110株からカタラーゼ遺伝子のクローニングを試みた。全DNAを制限酵素(EcoRI)で処理し,生じたDNA断片をショ糖密度勾配遠心法により分画した。DNA画分(2〜16kb)についてコスミド(Charomid9-36)を用いてin vitroパッケージングし,大腸菌カタラーゼ欠損変異株(Escherichia coli UM255)へ導入した。0.3%過酸化水素(H_2O_2)溶液を直接コロニーの縁に添加し,泡を生じたコロニーをカタラーゼ遺伝子を持つ形質転換株としてスクリーニングした結果,およそ1/400の割合で目的の形質転換株が得られた。この中には,B. japonicum USDA110株と同程度のカタラーゼ活性を持つ形質転換株が見られたことから,カタラーゼ遺伝子のクローニングが確認された。
- 帯広畜産大学の論文
- 1998-10-26
著者
-
佐藤 哲也
帯広畜産大学生物資源化学科
-
大和田 琢二
帯畜大生資科
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大和田 琢二
帯広畜産大学生物資源化学科
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佐藤 哲也
帯畜大生資科
-
白川 雪香
帯広畜産大学生物資源科学科
-
井川 香子
帯広畜産大学生物資源科学科
-
佐藤 哲也
帯広畜産大学
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