4-nitroquinoline 1-oxide刺激ラット舌粘膜上皮細胞の培養とin vitroでの癌化
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概要
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細胞の寿命は染色体末端に存在するテロメアによって決定され,またさまざまな細胞周期関連タンパクも老化の進行に働く.これらの因子の異常が複雑に絡み合って老化プロセスに影響を与え,さらに発癌にも関与すると考えられるが,実験的な検証は十分ではない.そこでin vitroでの発癌モデルを作製し,老化メカニズムの異常が発癌にどのように関わっているのかを実験的に検索した.6週齢のSD系雄ラットに4NQO水溶液を4週間投与後に舌粘膜を採取し,その上皮細胞をクローニングして得られた培養細胞を20回まで継代し実験に用いた(4NQO刺激群).また蒸留水のみを与えたものを対照とした(非刺激群).そしてこれらの細胞をヌードマウスに移植し組織学的変化を調べ,テロメラーゼ活性,TERT, TEP1, c-Myc, p16およびp53の発現,さらにβ-ガラクトシダーゼを検索した.その結果,20回継代を行った4NQO刺激群の細胞をヌードマウスに移植すると扁平上皮癌が発生したが,非刺激群では組織学的変化はみられなかった.4NQO刺激群における癌化の過程でテロメラーゼ活性が上昇した.これはTERTのmRNAの発現が増強していたことから,TERTの上昇によると考えられた.TEP1およびc-Mycの発現には変化がなかった.p53の発現は継代とともに上昇した.またp16も同様に上昇したが,細胞の癌化とともに急激に低下した.p16およびp53は細胞老化エフェクターで, D16の急激な低下は老化を回避する方向に働くと考えられた.これは非刺激群でβ-ガラクトシダーゼが強染したのに対して,4NQO刺激群では染色されなかったことから検証された.以上のことから,本実験モデルにおける細胞の癌化には,テロメラーゼ活性の上昇と細胞老化エフェクターであるp16の低下による細胞老化プロセスの異常が,深く関与していると考えられた.
- 大阪歯科学会の論文
- 2004-03-25
著者
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