シスプラチンによるヒト口腔扁平上皮癌細胞株のCaspase-2活性化
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概要
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シスプラチン(CDDP)は,DNA合成阻害およびアポトーシス誘導により優れた抗腫瘍作用を示すが,そのメカニズムは完全には解明されておらず,複雑多岐にわたっているものと考えられている.今回われわれはCDDPによるアポトーシス誘導に注目し,その過程におけるシトクロムcの放出とCaspase-2およびBaxタンパクとの関連性について検索した.実験にはヒト口腔扁平上皮癌細胞株HSC-4細胞を用い,CDDPによる細胞障害性をMTT assayで,そしてアポトーシスをTUNEL染色およびヒストン結合性DNA fragmentのELISA法にて確認した.Caspase-2, -3, -8および-9の変動はfluorometric assayにて解析し,またシトクロムcをcytochrome c immunoassayを用いて検出した.さらにBaxの発現をwestern blot法にて検索した.その結果,CDDPは濃度依存的にHSC-4細胞障害性を示しアポトーシスを誘導した.また時間経過に伴いシトクロムcの細胞質への放出およびCaspase-2,-3および-9の活性化が観察され,各種Caspase阻害薬によりアポトーシスが一部抑制された.さらにCaspase-2阻害薬によりシトクロムcの細胞質への放出が減少し,Baxのミトコンドリアへの移行が遅延した.これらのことから,CDDPによるアポトーシス誘導過程において,Caspase-2はミトコンドリア経路の上流で活性化し,シトクロムcの放出およびBaxのミトコンドリア膜への移行に関与することが示唆された.
- 大阪歯科学会の論文
- 2006-03-25
著者
-
森田 章介
大阪歯科大学口腔外科学第1講座
-
井関 富雄
大阪歯大・口腔外科第1
-
福地 和秀
大阪歯科大学口腔外科学第1講座
-
森田 章介
大阪歯科大学歯学部口腔外科学第一講座
-
森田 章介
大阪歯科大学口腔外科第2講座
-
井関 富雄
大阪歯科大学口腔外科学第1講座
-
井関 富雄
大阪歯科大学 第1口腔外科
-
福地 和秀
大阪歯科大学口腔外科学第一講座
-
福地 和秀
大阪歯科大学
-
森田 章介
大阪歯科大 口腔外科学第1
-
森田 章介
大阪歯科大学 第2口腔外科
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