A Kinetic Method for Measurement of Adenosine Deaminase Isozymes Using Different Concentrations of Substrate
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概要
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We developed a kinetic method for measuring the activities of adenosine deaminase (EC 3.5.4.4, adenosine aminohydrolase: ADA) isozymes, based on their different Km values for adenosine as substrate. ADA activity was measured using two different concentrations of substrate; high (20 mmol/l) and low (0.5 mmol/l) concentration solutions of adenosine.<BR>This kinetic method dose not require gel filtration, and is thus a relatively simple and rapid procedure. <BR>Serum ADA is separated by gel filtration into two types of isozymes which have been called ADAi (small form; 35,000 daltons and large form; 280,000 daltons) and ADA<SUB>2</SUB> (intermediate form; 100,000 daltons). ADA<SUB>2</SUB> shows markedly different kinetic properties from those of ADA<SUB>1</SUB>; ADA<SUB>2</SUB> has a higher Km value for adenosine and a lower deamination activity for 2'-deoxyadenosine than ADA<SUB>1</SUB>.<BR>Analytical recoveries of ADA isozymes by the kinetic method varied from 93.3 to 116.3%. Results of the present method correlated well with those of the gel filtration method in high-performance liquid chromatography.<BR>In clinical application, increased serum ADA<SUB>2</SUB> activity was observed in chronic liver diseases, such as chronic hepatitis, liver cirrhosis, and hepato-celluler carcinoma. However, serum ADA<SUB>1</SUB> activity did not increase significantly in only a few of many cases chronic liver disease. Studies on serial measurements of serum ADA isozymes in patients with liver disorders have demonstrated that the changes of ADA<SUB>1</SUB> activity are similar to those of aspartate aminotransferase and alanine aminotransferase activity, but the changes of ADA<SUB>2</SUB> activity differ.<BR>These results suggest that measurement of serum ADA isozymes activities by the present method is useful for testing liver function.
- Japan Society of Clinical Chemistryの論文
著者
-
中野 卓
大阪大学医学部附属病院臨床検査部
-
伏見 了
大阪大学医学部付属病院臨床検査部
-
有末 一隆
大阪大学医学部付属病院中央臨床検査部
-
宮井 潔
大阪大学医学部中央臨床検査部
-
林 長蔵
大阪大学医学部付属病院中央臨床検査部
-
丸井 洋二
大阪大学医学医学部附属病院中検臨床検査部
-
甲田 一馬
大阪大学医学医学部附属病院中検臨床検査部
-
岡 婦美代
大阪大学医学部附属病院中央臨床検査部
-
林 長蔵
大阪大学医学医学部附属病院中検臨床検査部
-
中野 卓
大阪大学医学部附属病院中央臨床検査部
-
有末 一隆
大阪大学医学医学部附属病院中検臨床検査部
-
宮井 潔
大阪大学医学部
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