The Carbohydrate Moiety of Human Urinary Kallikrein
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概要
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Highly purified human urinary kallikrein (HUK) [EC 3.4.21.35] was subjected to hydrazinolysis in order to release the carbohydrate moieties. The released oligosaccharides were N-acetylated with acetic anhydride and reduced with sodium borohydride (NaB^3H_4). The radioactive oligosaccharides were applied to a column of Hitachi Custom Resin #2630. One neutral (N) and five acidic (AI-AV) peaks were observed, indicating that the HUK was heterogeneous as regards the charge of the oligosaccharide moieties. Sialic acid residues of tritium-labelled AI and AII oligosaccharides were separately removed by neuraminidase treatment, and the asialo oligosaccharides of AI and AII thus obtained were separated by successive chromatographies on columns of Bio-Gel P-4,concanavalin A-Sepharose 4B and Ricinus communis agglutinin-Sepharose 4B, and their structures were investigated by a combination of endo- and exo-glycosidase digestions. Tritium labelled asialo-oligosaccharides AI and AII were each applied to a column of Bio-Gel P-4,and several peaks (AI-1,AI-2 and AI-3 from AI, and AII-1,AII-2 and AII-3 from AII) were obtained. The main asialo-oligosaccharides, AI-2 and AII-2,were each digested with a mixture of β-galactosidase and β-N-acetylhexosaminidase, and yielded small oligosaccharides having the structures aMan_2-βMan-βGlcNAc-GlcNAc and aMan_2-βMan-βGlcNAc-(Fuc-)-GlcNac, respectively. These results indicate that a major portion of the HUK oligosaccharide has a common core structure, and that heterogeneity arises from 1) variation of the charge of the oligosaccharides, 2) variation of the molecular weights of the oligosaccharides.
- 社団法人日本薬学会の論文
- 1983-03-25
著者
-
辻 勉
東大・薬・生体異物
-
山本 一夫
Faculty Of Pharmaceutical Sciences University Of Tokyo
-
池北 雅彦
東京理科大学 理工学部 応用生物科学科
-
大沢 利昭
Division Of Chemical Toxicology And Immunochemistry Faculty Of Pharmaceutical Sciences University Of
-
大沢 利昭
東京大学薬学部
-
辻 勉
東京大学薬学部
-
辻 勉
Division of Chemical Toxicology and Immunochemistry, Faculty of Pharmaceutical Sciences, University
-
池北 雅彦
Department of Biochemistry, Faculty of Pharmaceutical Sciences, Science University of Tokyo
-
山本 一夫
Division of Chemical Toxicology and Immunochemistry, Faculty of Pharmaceutical Sciences, University
-
木付 和幸
Department of Biochemistry, Faculty of Pharmaceutical Sciences, Science University of Tokyo
-
守屋 寛
Department of Biochemistry, Faculty of Pharmaceutical Sciences, Science University of Tokyo
-
木付 和幸
山口東京理大 基礎工
-
木付 和幸
Department Of Materials Science And Environmental Engineering Faculty Of Science And Engineering Tok
-
守屋 寛
Department Of Biochemistry Faculty Of Pharmaceutical Sciences Science University Of Tokyo
-
池北 雅彦
東京理大
-
池北 雅彦
Department Of Biochemistry Faculty Of Pharmaceutical Sciences Science University Of Tokyo
-
大沢 利昭
Division Of Chemical Toxicology And Immunochemistry Faclty Of Pharmaceutical Scieces University Of T
-
木付 和幸
山口東京理科大学、基礎工学部、物質・環境工学科
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