Bifidobacterium adolescentisのマルチトール分解酵素 (α-グルコシダーゼ)の分離と精製
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概要
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マルトースの還元によって得られるマルチトールのα-1, 4-グルコシド結合は,動物消化管や微生物などによってきわめて分解されにくいが,成人糞便から分離されたBifidobacterium adolescentis type a, E194 aはマルチトールをよく分解することを認め,マルチトールおよびマルトース分解活性を指標に酵素の分離,精製を行い, 3種のα-グルコシダーゼを単離した.乳糖を炭素源とした肝臓培地を用い, CO2中で培養した菌体から超音波処理によって粗抽出液を得た.さらに硫安分画,リン酸カルシウムゲル吸着, DEAE-セファデックスクロマトグラフィー,セファデックスG-200ゲル濾過,ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィーおよびデンプンブロック電気泳動によって3種のα-グルコシダーゼ, I, IIaおよびIIbを得た.いずれもディスク電気泳動, SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動および沈降分析によって単一なタンパクであることが示された.本酵素の分子量はゲル濾過の結果からI490,000, IIaおよびII bはともに120,000を与えた.一方SDS-電気泳動の結果はI97,000, IIaおよびIIbは60,000の分子量を与え,これらの結果から酵素Iは同種のサブユニットから成る5量体構造を,IIaおよびIIbは同じく2量体構造を持つことが推定された.
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