ブタ甲状腺濾胞および濾胞上皮細胞の機械的分離について
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概要
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甲状腺の濾胞および濾胞上皮細胞の機械的な分離方法について検討した.ブタ甲状腺を5〜10mm角の組織片に切断後,2枚のカミソリで細断し,ステンレス製メッシュ(210μm)を通して濾胞と濾胞上皮細胞が混在する濾液を得た.濾液をPercollの連続密度勾配上に重層して遠心(800×g,30分,4°C)した結果,連続密度勾配中に2本のバンド形成が認められた.上方のバンドには濾胞が,下方のバンドには単離濾胞上皮細胞がそれぞれ優位であった.単離細胞の細胞膜は保持されていたが,細胞内小器官などの微細構造には分離の過程で若干変化がみられた.分離細胞の37°C,5%二酸化炭素-95%空気環境下培養では,トリパンブルーに染色されない細胞の割合が増加し,細胞活性の復元が示唆された.以上の結果から,甲状腺をカミソリで細断し,Percollを用いた連続密度勾配中で遠心することにより,甲状腺濾胞および濾胞上皮細胞を単離することが可能であると考えられた.
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