ドライアイス•アルコールで-79Cに凍結保存されたマウス胚の生存性
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概要
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dimethyl sulfoxide (DMSO)またはグリセリンの存在下で,-79Cのドライアイス•アルコールに凍結保存されたマウスの8細胞卵と初期胚盤胞の生存性を明らかにし,-79Cにおけるマウス胚の長期凍結保存の可能性について検討した.得られた結果はつぎのとおりである.1) DMSOの存在下で-79Cに0,2,7,30,60,90および120日間凍結保存された8細胞卵の生存率はそれぞれ89,77,75,48,44,31および26%であり,-79Cに7日間凍結保存しても比較的高い生存率(75%)が維持されるが,それより長期間の保存では生存率が著しく低下した.2) DMSOの存在下で-79Cにおける初期胚盤胞の凍結保存成績は8細胞卵におけると同じ傾向がみられた.3) グリセリンの存在下で8細胞卵および初期胚盤胞を-79Cで凍結保存すると,6時間保存では比較的高い生存性(63-65%)が維持されるが,17時間以上の保存では著しい生存性の低下が生じた.4) -79Cに凍結された8細胞卵および初期胚盤胞を-196Cの液体窒素へ浸漬して急冷すると.いずれも生存性が低下した.5) 8細胞卵の凍結過程の-50Cまたは-60Cから,-79Cのアルコールヘサンプルを浸漬して急冷すると,-79Cまでを緩慢冷却した8細胞卵に比べて,-79Cにおけるその後の凍結保存時間の経過にともなう生存性の低下が大きかった.以上の成績から-79Cのドライアイス•アルコールに凍結保存されたマウス胚は,DMSOの存在下では7日間,グリセリンの存在下では6時間しか十分な生存性が維持されず,マウス胚を-79Cで長期間凍結保存することは困難と思われる.
- 社団法人 日本畜産学会の論文
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