マイクロプレートを用いた雄シバヤギ血漿中5αジヒドロテストステロンの酵素免疫測定法

概要

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雄シバヤギ血漿中5α-ジヒドロテストステロン(5α-DHT)に関する酵素免疫測定法(EIA)について検討した。抗血清は抗5α-DHT-11α-Succinate-BSAを,酵素標識ホルモンには5α-DHT-11α-Succinate-peroxidase(5α-DHT-HRP)を用いた。抗血清は100,000倍に希釈・使用が可能であった。また,抗血清にはテストステロンが30%交叉反応するため,Bond Elut CN-Uを用いたカラムクロマトグラフィーによる精製を行い,被検血漿中の5α-DHTとテストステロンを分離・測定した。その結果,酢酸エチル : ベンゼン=2 : 98の展開液を流したところ,1.00-4.25mlの範囲に5α-DHTが溶出された。添加回収試験において添加量0.1-1.0pgの各濃度での回収率は,平均100.45%±2.13となった。再現性試験における頸静脈血および精巣静脈血の測定内変動係数(n=6)は各々6.38%および5.94%となり,測定間変動係数は8.36%ならびに11.53%となった。以上の結果から,雄シバヤギの血漿中5α-DHT濃度を,本法を用いて測定することが可能であることを明らかにした。
東京農業大学の論文
2002-12-20