デキストラン硫酸を分離増強剤とするキャピラリー電気泳動法による二本鎖DNAの分離(「特集」キャピラリー電気泳動法の新展開)
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概要
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キャピラリー電気泳動による二本鎖DNAの分離を行った.分離法としてカルボキシメチルセルローズ(CMC)を用いたポリマー溶液での方法を検討した.CMCの添加により, 低分子の核酸と二本鎖DNAが容易に分離されたが, CMC単独では二本鎖DNA 100塩基対から1000塩基対のDNA断片を分離することはできなかった.しかし, この系にデキストラン硫酸を添加すると, DNA断片の分離が可能になった.分離条件は0.5%CMC, 2.5%デキストラン硫酸(分子量8000), 5mmol/l EDTAを含む25mmol/l Tris-グリシン緩衝液(pH8.4)をポリマー溶液とし, キャピラリーの内壁は未処理のものを用いた.泳動は30℃, 8kVで行い, 検出は260nmでの紫外部吸収で行った.本法は低分子核酸と高分子DNA断片を明りょうに分離することができるため, DNA増幅法であるポリメラーゼ連鎖反応(PCR)の生成物を精製することなく直接キャピラリー電気泳動により分析することができる.
- 1997-06-05
著者
-
荒川 秀俊
昭和大学薬学部薬品分析化学教室
-
辻 章夫
昭和大学薬学部
-
辻 章夫
昭和大学薬学部:文部省
-
前田 昌子
昭和大学薬学部臨床分析化学教室
-
前田 昌子
昭和大学薬学部薬品分析化学教室
-
前田 昌子
昭和大学 歯 小児歯
-
前田 昌子
昭和大薬・薬品分析化学
-
荒川 秀俊
昭和大学薬学部薬品分析化学
-
前田 昌子
昭和大学薬学部分析化学
-
荒川 秀俊
昭和大学薬学部
-
前田 昌子
昭和大学薬学部
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