ヒト血中セクレチンの時間分解蛍光イムノアッセイ
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概要
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血中セクレチンを測定する目的で, 高感度な時間分解蛍光イムノアッセイ法を開発し検討した.イムノアッセイは抗家兎IgG抗体を固相化したマイクロタイタープレート中で血中セクレチンとウシ血清アルブミン(BSA)-セクレチンの結合体にユウロピウム(III)キレ-トを標識化したものを競合させる方法で行った.このとき検量域は, 2.5〜100 pg/assay, 50%阻害濃度は29.2pg/assayであった.これは, セクレチンに直接ユウロピウム(III)キレートを標識化したものと競合させる方法に比較して11.8倍高感度であった.又, 血中セクレチンを測定するためには試料の前処理が必要であり, これは市販の逆相の樹脂を用いることにより行った.このとき, 回収率はサンプルにプロテアーゼ阻害剤としてAprotininとEDTAを加えることにより良好な値が得られた.前処理を行った試料は濃縮しての測定が可能となり, 血しょう中セクレチンの検出感度は8.3pg/mlであった.
- 社団法人日本分析化学会の論文
- 1992-12-05
著者
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