NADHオキシダーゼを用いたNAD^+依存性酵素活性の化学発光測定とそのイムノアッセイへの応用
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概要
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S.mutansより単離された還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド(NADH)オキシダーゼ(NOD)を用い, グルコース-6-リン酸デヒドロゲナーゼ(G6PDH)及びアルカリ性ホスファターゼ(ALP)の酵素活性測定法を確立し, 免疫学的測定法へ応用した.G6PDHとの共役測定系では, 1.0μU/ml〜0.5mU/mlの範囲で測定が可能であり, 2SD法による最小検出感度は1.0×10^<-18>mol/assayであった.一方, ALPにより産生されるNAD^+をアルコールデヒドロゲナーゼ(ADH)とNODを用いた酵素サイクリング系に供した場合には, 20fM〜10pMの範囲で測定が可能であり, 2SD法による最小検出感度は4.0×10^<-19>mol/assayであった.このALPの測定系を用い, ヒト血清じゅう毛性ゴナドトロビン(hCG)の測定に応用したところ, 0.2〜100 mIU/mlの範囲で測定が可能であり, 既存の時間分解蛍光(TR-FIA)測定系であるデルフィアキットとの相関も良好であった.
- 社団法人日本分析化学会の論文
- 1994-05-05
著者
-
辻 章夫
昭和大学薬学部
-
辻 章夫
昭和大学薬学部:文部省
-
前田 昌子
昭和大学薬学部薬品分析化学教室
-
前田 昌子
昭和大学 歯 小児歯
-
前田 昌子
昭和大薬・薬品分析化学
-
岡本 雅司
日本メジフィジックス(株)中央研究所
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