妊婦血清よりのSP_1の分離精製法およびその過程に検出されたγ分画SP_1の検討
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概要
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蛋自低濃度迅速測定装置であるLAsystemにSP_1(pregnancy specific β_1-glycoprotein)を組み込むone stepとして,高純度SP_1の大量精製法について検討し,その精製過程で検出されたγ分画のSP_1について報告する.1)SP_1の分離精製のために,妊婦血清を材料として40%飽和硫酸アンモニウム塩析を行い,Sephadex G-150gel filtration,DE-52cellulose column chromatography,hydroxylapatite column chromatography,SP_1-negative affinity Sepharose 4B column chromatography,FPLC systemのmono Q column chromatographyの順に精製を行つた.できたSP_1は蒸留水で透析,凍結乾燥し白色の粉末を得た.SP_1-negative affinity Sepharose 4Bの作製法は,男子血清を50%飽和硫酸アンモニウムで塩析をし,hydroxylapatite columnに通したものを家兎に免疫した.できた抗血清のIgG分画をCNBr-activated Sepharose 4Bと反応させて得た.本法により精製SP_1の純度は99%以上,回収率16%となつた.2)精製SP_1(SP_1-β)は免疫電気泳動でβ分画に属する糖蛋白で,分子量は72,000等電点3.80〜4.55にbandを作り,特にpI4.15の所が強く染色された.DE-52celluloseを低塩濃度緩衝液で,素通りしてきたSP_1(SP_1-γ)はneuraminidase処理SP_1と等電点分画で全く違つた所に位置し,少なくともpI5.3,5.5,5.65,5.8の4カ所に分布していることが分つた.このSP_1-γは免疫電気泳動でγからδ分画に位置し,妊婦血清にも存在することが分つた.以上,本法により高純度大量SP_1精製の道が開け,また分離精製途中で新しい複数のSP_1抗原物質SP_1-γが発見できた.
- 社団法人日本産科婦人科学会の論文
著者
-
早川 滋彦
鈴鹿中央総合病院
-
杉山 陽一
三重大学医学部産科婦人科学教室
-
伊東 雅純
三重大学医学部産科婦人科
-
今泉 博充
豊橋市民病院産婦人科
-
早川 滋彦
三重大学医学部産科婦人科学教室
-
西山 幸男
三重大学医学部産婦人科学教室
-
今泉 博充
三重大学医学部産科稀人科学教室
-
伊東 雅純
三重大学医学部産科婦人科学講座
-
今泉 博充
三重大学医学部産科婦人科学教室
-
西山 幸男
三重大学医学部産婦人科
-
杉山 陽一
三重大学医学部産婦人科
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