ウシ体外受精由来胚のノンステップ法移植
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概要
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ウシ体外受精由来胚盤胞期胚をI法では,1.36Mグリセリンを含む0.25Mトレハロース加20%血清添加リン酸緩衝液(mPBS)で,II法では,1.6M1,2-プロパンジオール加mPBSを媒液として凍結した.I法ではストロー内の胚(2個/ストロー)を含む液層(5~10mm)の両端を空気層(3~5mm)ではさみ,残りの部分は耐凍剤を含まない同液で満たした.II法では,ストロー内の胚(2個/ストロー)を含む液層(5~10mm)の両端を空気層(3~5mm)ではさみ,残りの部分を0.2Mシュクロース加mPBSで満たした.<BR>次いでI法では,ストローを-7Cにセットしたプログラムフリーザー(ET-1,富士平工業製)内に移して,植氷後10分間保持した.その後毎分0.45Cで-25Cまで温度を下げ,液体窒素中に投入して保存した.H法では,ストローを直接0Cにセットしたプログラムフリーザー内に移し,毎分1Cで-6Cまで冷却後,植氷を行い10分間保持した.その後毎分0.3Cで-30Cまで温度を下げ,同温で10分間保持した後,液体窒素中に投入して保存した.<BR>凍結胚は30Cの微温水中で融解後直ちに受卵牛に移植(1ストロー/頭)した.受胎率はI法で12.5%(3/24),II法で37.8%(17/45)であった.現在までI法では妊娠した3頭中1頭が分娩し,残りの2頭は妊娠中である.II法では17頭中11頭(2頭は双子)が分娩を終了し,4頭(1頭は双子)が妊娠2ヵ月齢から4ヵ月齢の間に流産,残りの2頭(1頭は双子)は分娩予定月に襲った台風による事故と母ウシの肺炎のため,母ウシと共に胎児も死亡した.
著者
-
片平 清美
鹿児島大学農学部附属農場入来牧場
-
柳田 宏一
鹿児島大学農学部
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片平 清美
鹿児島大学農学部
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中西 喜彦
鹿児島大学 農
-
後藤 和文
鹿児島大学大学院連合農学研究科
-
後藤 和文
鹿児島大学
-
宅萬 義博
鹿児島大学農学部
-
松浦 忍
鹿児島大学農学部家畜繁殖学教室
-
渡久地 政康
沖縄県畜産試験場
-
野中 克治
沖縄県畜産試験場
-
柳田 宏一
鹿児島大学
-
中西 喜彦
鹿児島大学農学部家畜繁殖学教室
-
宅萬 義博
鹿児島大学農学部家畜繁殖学教室
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