マウス胎盤に高発現しているリソソーム・システインプロテアーゼ、カテプシン-P/Jおよび-6の組換えタンパク質の製作

概要

論文の詳細を見る
胎盤組織に局在するカテプシン(システインプロテアーゼ)は、ここ数年で8種類も同定されたが、いずれも遺伝子レベルの発現が確認されているだけである。本研究では、妊娠後11.5日から15.5日までのマウス胎盤でのみ発現するカテプシン-P/J (Cat-P/J)および-6 (Cat-6) に注目し、組換えタンパク質の製作による機能解明を目指した。両組換えタンパク質は大腸菌pET発現系で製作した。蛍光基質での解析により、Cat-Pはカテプシンの典型的基質であるZ-Phe-Arg-MCAとαスロンビンの基質であるBoc-Val-Pro-Arg-MCAの両者を、Cat-6は後者のみを切断することが明らかになった。これらの活性は非常に弱いものであったが、両者の基質特異性の差が初めて明らかになった。次に高活性の組換え体を得る目的で、昆虫細胞発現系での製作を試みた。組換えCat-P/Jの発現は、感染開始から4日目の培地中で最大となることを確認したが、精製するには至らなかった。
九州保健福祉大学の論文
2005-03-25