馬伝染性子宮炎の迅速診断のためのPCR法の開発
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概要
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馬伝染性子宮炎(CEM)の迅速診断法を確立するためPCR法を開発し,その評価を行った.まず,本症の病原菌であるTaylorella equigenitalisのKentucky-188株ゲノムDNAをSau3A1で部分消化して大腸菌にクローン化し,次に分類学的な近縁菌のゲノムDNAをプローブに用いて交差ハイブリダイゼイションを行って種特異的な756bpDNA断片が挿入されたクローンを選別し,最後にT. equigenitalisと種特異的に反応する2組のPCR用プライマー配列(P1-N2およびP2-N2)と診断に適したPCRの増幅条件を明らかにした.次に実験感染牝馬の生殖器スワブを用いて,開発したPCR法の検出感度を菌分離法と比較したところ,1 step PCR法では同程度の感度でまた2 step semi-nested PCR法ではより高い感度でそれぞれT. equigenitalisを検出した.一方,野外由来の生殖器スワブ3,123検体からは,1 stepPCR法で12検体が,菌分離法で2検体がそれぞれ陽性を示した.このPCR陽性検体は5頭の牝馬から採取されており,その中の3頭は以前に行われた菌分離もしくは血清学的検査で陽性であった.以上の成績から,本PCR法は特異的で感度の高い方法としてCEMの迅速診断に応用できることが示唆された.
- 社団法人日本獣医学会の論文
著者
-
鎌田 正信
日本中央競馬会競走馬総合研究所
-
安斉 了
日本中央競馬会競走馬総合研究所栃木支所
-
江口 正志
(独)農業・生物系特定産業技術研究機構動物衛生研究所
-
山本 孝史
農林水産省家畜衛生試験場
-
安斉 了
中央競馬会競走馬総合研究所
-
安斉 了
日本中央競馬会美浦トレーニングセンター
-
江口 正志
動物衛生研究所北海道支所
-
鎌田 正信
日本中央競馬会 競走馬総研
-
関崎 勉
農林水産省家畜衛生試験場
-
江口 正志
(独)動物衛生研究所北海道支所
-
江口 正志
(独)農業・生物系特定産業研究機構動物衛生研究所疫学研究部
-
江口 正志
農林水産省家畜衛生試験場
-
奥田 敏男
北海道日高家畜保健衛生所
-
Kamada M
Equine Research Institute Japan Racing Association
-
安斉 了
日本中央競馬会競走馬総合研究所 企画調整室
-
安斉 了
日本中央競馬会競走馬総合研究所
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