フローインジェクション/固定化酵素分光光度法による尿中硫酸抱合胆汁酸の測定法の開発
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概要
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本論文は,新規酵素胆汁酸硫酸スルフェターゼ(BSS)とWST-5を用いて,迅速,簡便,高感度な硫酸抱合胆汁酸(SBA)のFIA/分光光度分析法を開発した.測定原理は次のとおりである.SBAはBSSにより脱硫酸化し,3β-ヒドロキシステロイドが生成する.この3β-ヒドロキシステロイドが3β-ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ(3β-Hydroxysteroid dehydrogenase: 3β-HSD)の触媒作用下でNAD^+と反応し,NADHを生成する.次にジアホラーゼによりWST-5がNADHと反応して水溶性のホルマザンブルーを生成する.この生成物は,550 nmに吸収極大があるので,その吸光度によってSBAを定量した.本法は分析速度が15検体/h,相対標準偏差は1〜5.4%であり,測定の範囲は1〜75μMであった.
- 社団法人日本分析化学会の論文
- 2003-03-05
著者
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