4. 細胞凍結衝撃破砕装置Cryo Clean Blaster(CCB)による細菌細胞の破砕(凍結及び乾燥研究会創立30周年記念シンポジウム,創立30周年記念号)
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概要
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細胞を急速凍結し,高速で金属表面に衝突させる細胞破砕装置-Cryo Clean Blaster(CCB)の細胞破砕性能および細胞破砕様式について,細菌を対象にして実験を行った.破砕の程度および破砕様式を示す指標としては,CCB破砕後,フェノール処理して得られる長鎖のDNAの取得量を用いた.Escherichia coliではDNA収量は対数期,定常期の細胞共に溶菌法(Lysozyme, SDS処理)の約2倍であり,Hyperchromicity約40%,長鎖23kbp以上であった.位相差および電子顕微鏡写真では細胞は外形を保ったゴースト様で,細胞は細かい破片に壊れるのではなく,内容のみが取り出されるような壊れ方であると考えられた.Bacillus subtilis, L actbacillus plantarumでは,対数期,定常期の細胞とともに精製DNA収量は溶菌法と同程度であったが,Lysozyme処理後CCB破砕を行うと約2倍の収量が得られた.急速凍結後の衝突破砕操作を2回続けて行う方式により,Arthrobacter globiformisで,対数期,定常期の細胞とともに溶菌法の約3倍の精製DNA収量が得られた.
- 低温生物工学会の論文
- 1990-10-20
著者
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