5. 細胞凍結衝撃破砕装置Cryo Clean Blaster(CCB)による糸状菌および放線菌の破砕(平成2年度第36回凍結及び乾燥研究会研究報告,創立30周年記念号)
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概要
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Cryo Clean Blaster(CCB)は,細胞懸濁液をスプレーノズルより極低温窒素気相中に噴霧して急速凍結させ,生成微小凍結粒を金属板に高速で衝突させて細胞を破砕する装置で,酵母,細菌,植物培養細胞を破砕可能である.菌糸状に発育し強固な凝集体を形成する糸状菌,放線菌では,スプレーノズルの目詰まりのため噴霧できず,CCBの適用は困難であった.そこで,予め凝集菌体を高圧噴霧することによって容易に個々の菌糸細胞に分散させ得ることを見出し,CCBによる破砕に成功した.CCB破砕処理によりPenicillium chrysogenum Streptomyces griseus, Streptomyces coelicolorから,23kbp以上の長鎖のDNAが得られた.S. coelicolorから得られたRNAs収量は,従来用いられている溶菌法による収量よりやや高かった.S griseus, S. coelicolorからのRNAsでは,電気泳動で16S, 23S rRNAが明確に確認でき,CCBによる破砕処理が一貫して低温で行われるため,破砕処理中のRNaseなどの分解酵素の働きを抑制していることが示唆された.
- 低温生物工学会の論文
- 1990-10-20
著者
-
山里 一英
東大応微研
-
山里 一英
凍結及び乾燥研究会
-
山里 一英
東京大学応用微生物研究所
-
津村 正憲
大陽酸素(株)技術研究所
-
市田 泰三
大陽酸素(株)技術研究所
-
大森 良幸
大陽酸素(株)技術研究所
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