Rab5結合因子同定のための迅速且つ簡便なFar-western blotting
スポンサーリンク
概要
- 論文の詳細を見る
低分子量Gタンパク質Rab5は細胞膜から初期エンドソームへの小胞輸送や初期エンドソーム同士の融合に関与する因子であることが知られている。過去の報告では,GTPγSなどの加水分解耐性GTPアナログを使用しFar-western blottingを行うことによってRab5結合因子が検出されている。しかしながら,この方法ではNEおよびNS反応の際に多量の加水分解耐性GTPアナログが必要であり,実験時間やコストが非常にかかる。本論文ではFar-western blottingのプローブとして常時活性型変異体Rab5Q79Lを用いることによって,NE反応とNS反応が必要なく加水分解耐性GTPアナログを使用しない簡便且つ実験コストが低い方法について記述する。この方法を評価するため,既知のRab5結合因子であるEEA1とRab5が結合するか否か検証したところ結合が確認された。さらにLC MS/MSによってRab5結合因子の同定を試みたところactin betaが同定された。我々の方法では実験時間が3-4時間程短縮され,実験コストは90-95%削減された。我々はこの方法がRab5による細胞内小胞輸送における重要な知見をもたらすものと考える。
- 2009-03-16
著者
-
小林 謙一
東京農大・応生科
-
山本 祐司
東京農大・応生科
-
田所 忠弘
東京農大・応生科
-
山本 祐司
東京農業大
-
田所 忠弘
東京農業大
-
田所 忠弘
東農大・生物応用化学科
-
小林 謙一
東京農業大学応用生物科学部生物応用化学科
-
小林 謙一
東京農大 応用生物科学
-
萩原 真
東京農業大学大学院農学研究科農芸化学
-
田所 忠弘
東京農大
-
小林 謙一
東京農業大学
関連論文
- 2-I-22 高脂肪摂取ラットにおけるビタミンA代謝の動態(一般演題,日本ビタミン学会第62回大会発表要旨)
- 2-III-20 ビタミンB_欠乏が腎臓のレチノール結合タンパク質(RBP)におよぼす影響(一般演題,日本ビタミン学会第62回大会発表要旨)
- 特許公報からみたイモ類、豆類の乾燥食品の変遷
- 特許公報からみた乾燥食品の変遷
- モルモット肺肥満細胞,末梢血中総白血球・好酸球、脾臓および胸腺リンパ球に及ぼす飼料油脂中n-3/n-6脂肪酸比率の影響
- Rab5結合因子同定のための迅速且つ簡便なFar-western blotting
- 変異TSC2とスモールGタンパク質の活性化 (特集 mTORをめぐるシグナルタンパク)
- 爆砕処理オリーブ葉粉末による脂肪吸収および胆汁酸再吸収の促進効果
- 2-III-11 ビタミンB_欠乏ラットの骨密度の解析(ビタミン学の原点・栄養学への21世紀的回帰, 日本ビタミン学会第59回大会)
- 3.ビタミンB_欠乏モデルマウスの作成(第394回研究協議会研究発表要旨)
- 2-II-19ビタミンB_欠乏ラット精巣の組織学的変化の発現に及ぼすメチオニン添加の影響(第55回大会一般研究発表)
- 2-II-17 ビタミンB_12欠乏ラット脳におけるB_12代謝について
- 2-II-14 ビタミンB_12欠乏モデルマウスの作製
- 4. ビタミンB_欠乏ラットにおけるメチオニンシンターゼ活性低下のメカニズム
- ジェランガム・κ-カラギーナンによる血清イムノグロブリンG産生について
- 2-II-35 ビタミンB_欠乏マウスにおけるTh1, Th2細胞の変動
- 3. ビタミンB_の新機能をさぐる
- 2-II-22 ヒトの動脈硬化性疾患における血清ビタミンB_, 葉酸およびホモシステイン値について
- 2-II-18 マウスのアレルギー反応に及ぼすビタミンB_の影響
- 八丈島の調味料についての食文化的一考察
- 古文書にみられる八丈島における食用とした薬草や自然毒による食害について
- 古文書にみられる八丈島の食生活に関する一考察 : 動物性食品について
- 『八丈筆記』における八丈島の食生活に関する一考察
- ビタミンB-12欠乏により変動するタンパク質の同定及びメチオニン添加によるその改善効果
- 2-III-14 ビタミンB_欠乏がメチオニン代謝関連mRNA転写量に及ぼす影響(ビタミン学の原点・栄養学への21世紀的回帰, 日本ビタミン学会第59回大会)
- 2-II-23 ストレプトゾトシン糖尿病ラットにおける膵臓中のS-アデノシルメチオニンおよびS-アデノシルホモシルテイン濃度の変動について
- 新しいアプローチから見た食品機能性成分の動態研究
- 2-II-16 脂肪細胞におけるRBP遺伝子発現調節機構の解析(一般研究発表,日本ビタミン学会第61回大会研究発表要旨)
- ラットにおけるマスタードオイル摂取の生理学的解析
- 2,4-ジニトロフェニルヒドラジン法,α,α'-ジピリジル法及び高速液体クロマトグラフィーによる食品中の総アスコルビン酸測定値の比較
- ラットを用いた D-Histidine の摂食抑制効果の検討
- ビタミンB_欠乏ラットにおける飼料タンパク質の利用
- サツマイモ(Ipomoea batatas Poiret)葉はラットの血糖上昇を抑制する
- サツマイモ葉凍結乾燥粉末配合パンの製パン性と品質
- サツマイモ葉乾燥粉末配合クッキーの品質と嗜好特性および保存安定性
- 8.ビタミンB_欠乏ラットの脂肪酸代謝 : ビタミンB研究委員会第352回会議研究発表要旨
- モルモットの肺肥満細胞におけるロイコトリエン生成および末梢血好酸球数と飼料油脂のn-3/n-6比レベルとの関係 : 動物
- ナス幼植物に対する二価鉄葉面散布が葉の鉄およびカルシウムの含有率に及ぼす影響
- ビタミンB_欠乏ラットの脳におけるOtx2遺伝子発現量の変動
- 水溶性絹フィブロインの消化・吸収性
- 2-II-21ビタミンB_のDNAメチル化に及ぼす影響(第55回大会一般研究発表)
- 12. ビタミンB_12におけるDNAメチル化の解析
- ビタミンB_12欠乏が中枢神経系に及ぼす影響の解析
- ラットにおけるマスタードオイル摂取の生理学的解析
- 2-III-15 ビタミンB_欠乏によるOtx2遺伝子発現抑制メカニズムの解析(ビタミン学の原点・栄養学への21世紀的回帰, 日本ビタミン学会第59回大会)
- 2-II-6 ビタミンB_の投与がマウスの免疫機能に及ぼす影響 : 第49回大会一般研究発表要旨
- 絹糸より調製した水溶性セリシンの精製とその消化性
- 1-III-7 運動負荷マウスのビタミンB_1量に及ぼすヒドロキシクエン酸投与の影響
- 特許公報からみた水産乾繰食品の変遷
- アドレノコルチコトロピックホルモン投与による日本ウズラ(Coturnix coturnix japonica)の組織中アスコルビン酸の変動
- パパイア果実の軟化酵素PGのアイソザイムに関する研究 : 植物
- ニワトリヒナ肝臓尿酸生成系酵素の活性に及ぼすビタミンA欠乏の影響
- ニワトリヒナのビタミンA欠乏に及ぼす飼料タンパク質含量の影響
- 3.ニワトリヒナのビタミンA欠乏とタンパク質代謝(II)(脂溶性ビタミン総合研究委員会 : 第150回会議研究発表要旨)
- ニワトリのビタミン代謝の生化学的研究 : (VII)デオキシチアミンの合成とその生理活性
- ブラックマッペのアンジオテンシンI変換酵素阻害因子の検索(第2報)
- ブラックマッペのアンジオテンシンI変換酵素阻害因子の検索
- ブラックマッペ発芽体の各部医におけるタンパク質および酵素活性の変動について
- ブラックマッペのグロブリンの性質
- 3.自然発症2型糖尿病ラットにおいてビタミンAの代謝は変動する(第324回脂溶性ビタミン総合研究委員会研究発表要旨)
- 2-I-15カロテノイドのビタミンA効力測定法に関する基礎的研究 : 第42回大会一般研究発表
- 高速液体クロマトグラフィーによるビタミンB_欠乏ラット組織のMethionine adenosyltransferase活性の測定
- 2-I-1 食品中のアスコルビン酸の測定に関する研究(第41回大会一般研究発表)
- シルク(家蚕および野蚕)パウダーの栄養特性と製パンへの利用
- 子供のカルシウム, リン, マグネシウム摂取の実態
- 2-IV-11 ビタミンB_欠乏は体内レチノール結合タンパク質(RBP)を減少させる(一般演題要旨,日本ビタミン学会第63回大会講演要旨)
- 5.低タンパク質食の継続的な摂取はビタミンAの代謝にネガティブな影響を及ぼす(第329回会議研究発表要旨,脂溶性ビタミン総合研究委員会)
- シルクパウダー添加クッキーに関する研究
- 2. 2型糖尿病と肥満におけるビタミンA代謝の変動(第331回会議研究発表要旨,脂溶性ビタミン総合研究委員会)
- カキの葉の組織構造並びに食物繊維成分について
- シルクパウダー添加マフィンに関する研究
- キャベツにおけるビタミンの損失率