遺伝子導入胎子線維芽細胞を用いて作出した豚核移植胚の体外発生に及ぼす融合・活性化法の影響(臨床繁殖学)
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概要
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Enhanced green fluorescene protein(EGFP)遺伝子導入体細胞を用いて豚核移植胚を作製する場合の融合・活性化法が,核移植胚の発生に及ぼす影響について検討した.核移植胚は除核した第二減数分裂中期卵子とEGFP遺伝子導入あるいは無処理の豚胎子線維芽細胞を用いて作製した.両群の核移植胚は,1回の電気刺激により融合と活性化を同時に誘起するか(FAS処理),あるいは2回の電気刺激を加えて融合と活性化(融合2時間後の活性化刺激:FBA処理)をはかった.電気的な活性化刺激を与えたすべての核移植胚に対してシクロヘキシミド処理を施し,体外培養により胚盤胞への発生を調べた.その結果,核体への遺伝子導入の有無に拘わらず,FAS処理された核移植胚はFBA処理されたものに比べて胚盤胞への発生率が高かった.また,胚盤胞への発生率は核体への遺伝子導入の有無により差異が認められなかった.さらに,EGFP遺伝子を導入した線維芽細胞由来の核移植胚にはEGFP遺伝子の発現を示す緑色蛍光が観察され,初期化の指標となるOct-4遺伝子の発現も確認された.これらの結果から,FAS処理の有効性が確認されるとともに,核体へのEGFP遺伝子の導入は核移植胚の発生に悪影響の無いことが示唆された.
- 社団法人日本獣医学会の論文
- 2003-09-25
著者
-
高橋 芳幸
北海道大学大学院獣医学研究科診断治療学講座繁殖学教室
-
森 匡
北海道大学 農
-
森 匡
北海道大学大学院農学研究科家畜改良増殖学教室
-
森 匡
北海道大学 大学院
-
片桐 成二
北海道大学大学院獣医学研究科繁殖学教室
-
片桐 成二
北海道大学大学院獣医学研究科診断治療学講座繁殖学教室
-
MARTINEZ DIAZ
北海道大学大学院獣医学研究科繁殖学教室
-
永野 昌志
北海道大学大学院獣医学研究科繁殖学教室
-
Martinez Diaz
北海道大学 大学院 獣医学研究科 繁殖学 教室
-
Diaz Mario
北海道大学 獣医研究
-
高橋 芳幸
北海道大学・大学院獣医学研究科
-
Katagiri S
Hokkaido Univ. Hokkaido Jpn
-
永野 昌志
北海道大学 大学院獣医学研究科
-
高橋 芳幸
Hokkaido Univ. Sapporo Jpn
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