豚卵胞内卵子の成熟培養時間が単為活性化誘起および核移植後の発育に及ぼす影響(臨床繁殖学)
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概要
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核移植のレシピエントとなる豚卵子の成熟培養時間について検討した.はじめに成熟に要する時間を検討した結果, ほとんどの卵子は32時間で第二減数分裂中期(MII期)に到達した.ついで, 電気刺激(ES)とシクロヘキシミド(CHX)を用いた活性化法を検討した.32, 36, 42及び48時間培養した卵子は, ESとCHXで処理すると, ESのみの処理に比べ前核形成率は高かった.また, ESとCHXで活性化した単為活性化胚の胚盤胞への発育率は42時間培養した卵子が最も高く, 卵子成熟の完了にはMII期到達後さらに10時間程度の培養が必要であることが示唆された.最後に, 成熟培養33時間目(MII期到達直後)および44時間目に除核した卵子と血清飢餓培養した豚胎子繊維芽細胞を融合させて核移植胚を作出した.それぞれ成熟培養39〜40時間目(成熟完了前後)および50〜51時間目にESとCHXで活性化処理して核移植胚の発育を比較した.その結果, 胚盤胞への発育はMII期到達直後に除核して成熟完了時に活性化させて作出した核移植胚の方が高かった(13.6vs.1.8%).以上の結果から, 豚卵子の成熟完了にはMII期到達後も約10時間の培養が必要であり, 核移植のレシピエントとして使用する場合はMII期到達時に除核して成熟完了時に活性化処理すると核移植胚の発生率の高いことが示された.
- 社団法人日本獣医学会の論文
- 2001-08-25
著者
-
高橋 芳幸
北海道大学大学院獣医学研究科診断治療学講座繁殖学教室
-
池田 幸司
北海道大学大学院獣医学研究科診断治療学講座繁殖学教室
-
高橋 芳幸
北海道大学・大学院獣医学研究科
-
高橋 芳幸
Hokkaido Univ. Sapporo Jpn
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