ビオチン-アビジン生物親和結合を用いる同一酵素及び異種酵素の多層固定化リアクター
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概要
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孔直径53.0nmのアミノプロピル化多孔性ガラスビーズ(NH_2-CPG)を用い, 段階的なビオチンーアビジン生物親和結合により, 孔内部空間を酵素固定化場とし, 酵素分子を直鎖状に固定化する方法について検討した.また, それぞれの段階での酵素の固定化量から, 孔内部空間での酵素分子の配向を推定した.NH_2-CPGにグルタルアルデヒド橋かけ法により固定化した場合, 酵素の分子量が30万以下の酵素(グルコースオキシダーゼとアルコールオキシダーゼ)の固定化量はほぼ一定(4nmol/10mg NH_2-CPC)であった.更に, アビジン分子を橋かけ分子として酵素を固定化すると, 固定化量は酵素の分子量に大きく依存し, 分子量が30万以上の酵素(β-ガラクトシダーゼ)では固定化量は減少し, 30万未満の酵素では固定化比率がほぼ1:1に直鎖状に酵素をCPG細孔内に連続固定化できた.以上の結果から, 同種の酵素及び異種酵素の連続固定化リアクターの最適設計法を提案した.
- 2001-09-05
著者
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