レーザ・スタイレクトミー法で採取した師管液中のphytoplasmaのPCR法による検出
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概要
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レーザ・スクイレクトミー法とPCR法を組み合わせた新しいphytoplasma検出法の開発を行った。黄萎病(RYD)罹病イネを吸汁中のトビイロウンカの口針をレーザ光線で切断し, そこから流出する純粋な師管液をガラス細管に採取した。その師管液中のphytoplasmaのPCR法による直接検出を試みた。師管液をそのままで, あるいは95℃, 5分の熱処理を行った後, テンプレートDNAとして用い, また, 2組のプライマー・ペアーによりphytoplasmaの16S rRNA遺伝子領域(1.37kbとO.75kb)をPCR増幅させた。その結果, 罹病イネから採取したほとんどすべての標本から予想されたサイズのPCR産物が得られたが, 健全イネ由来のものからは全く得られなかった。PCR産物の制限酵素切断パターンおよび塩基配列の決定により, それらはRYD-phytoplasmaの16S rRNA遺伝子由来のものであることが証明された。以上により, レーザ・スクイレクトミー法とPCR法を併用したこの新しい検出システムはphytoplasmaを鋭敏に, かつ特異的に検出出来ることが明らかになった。
- 日本植物病理学会の論文
- 1996-04-25
著者
-
三橋 渡
独立行政法人農業生物資源研究所
-
佐藤 守
蚕糸・昆虫農業技術研究所
-
佐藤 守
農業生物資源研究所
-
三橋 渡
生物研
-
難波 成任
東京大学大学院農学生命科学研究科
-
且原 真木
蚕糸・昆虫農業技術研究所:(現)岡山大学資源生物科学研究所
-
川北 弘
農業生物資源研究所
-
川北 弘
蚕糸・昆虫農業技術研究所
-
三橋 渡
蚕糸・昆虫農業技術研究所
-
河部 暹
蚕糸・昆虫農業技術研究所
-
河部 暹
蚕糸・昆虫農業技術研究所:(現)東北農業試験場
-
難波 成任
東京大学大学院 農学生命科学研究科 生産・環境生物学専攻
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