4. 凍結及び浸透圧ストレスにおけるフリーラジカル産生 : ヒト多形核白血球をモデルとして(平成2年度第36回凍結及び乾燥研究会研究報告,創立30周年記念号)
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概要
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ヒト多形核白血球(PMN:polymorphonuclear leukocyte)は凍結保存が不可能な細胞の代表であり,凍結傷害の機構を調べるモデルとして適している.凍結に対する感受性が高い理由は主として凍結時の浸透圧の上昇に対してPMNの感受性が他細胞に比較して高い為と考えられる.PMNは-2〜-5℃での細胞外凍結,750mOsm以上の高張溶液に短時間晒されると貧食能,走化能をレセプターの損失により失う.凍結及び浸透圧ストレスによる膜傷害の機構をさらに知る目的で,浸透圧ストレスによりPMNが活性酸素を生成するかどうか,ルミノールを増光剤としたケミルミネッセンス法で調べた.最終浸透圧750mOsm以上で発光がみられ,浸透圧の高まりとともに発光は増大した.一方50〜250mOsmの低浸透圧下では発光は認められなかった.-5℃での細胞外凍結では融解直後に発光が観察されたが,-80℃で急速凍結して細胞内凍結させたPMNでは発光はみられなかった.EPR測定の結果浸透圧ストレスによる0_2^^-の産生が確認された.細胞内のcAMPは0_2^^-産生に抑制的に働くが,prostaglandin E1, theophylline処理で細胞内cAMP濃度を高めるか,細胞膜を通過するdbcAMPを添加するとPMNの浸透圧抵抗性は未処理時の750mOsmから1020mOsmへと高まった.以上から凍結が進行し細胞が脱水されて浸透圧ストレスがかかると,PMNは活性酸素を非合目的に産生しそれがPMNの膜傷害に関連していると推察された.
- 1990-10-20
著者
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高橋 恒夫
東京大学医科学研究所細胞プロセッシング研究部門
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高橋 恒夫
北海道大学大学院獣医学研究科環境獣医学講座放射線学教室
-
高橋 恒夫
東京大学細胞プロセッシング
-
仲井 邦彦
北海道赤十字血液センター
-
関口 定美
北海道赤十字血液センター
-
高橋 恒夫
北海道赤十字血液センター
-
高橋 恒夫
北海道赤十字血液センター:東京大学医科学研究所
-
桑原 幹典
北海道大学大学院獣医学研究科環境獣医学講座放射線学教室
-
平岡 和佳子
明治大・理工・物理
-
平岡 和佳子
北海道大学獣医学部放射線学講座
-
細田 真理
北海道赤十字血液センター
-
桑原 幹典
北海道大学大学院獣医学研究科環境獣医科学
-
桑原 幹典
北海道大学 放射線
-
仲井 邦彦
東北大学大学院医学系研究科環境保健医学分野
-
桑原 幹典
北海道大学大学院獣医学研究科環境獣医科学講座放射線学教室
-
桑原 幹典
北海道大学
-
仲井 邦彦
東京大学医科学研究所細胞プロセッシンクセ研究部門北海道赤十字血液センター
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