尿細管上皮細胞とＨｅｐａｒｉｎ‐ｂｉｎｄｉｎｇ ＥＧＦ‐ｌｉｋｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ
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概要
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膜結合型heparin-binding EGF-like growth factor (proHB-EGF) を過剰に発現させたcell line (NRKproHB-EGF) を確立させ，尿細管上皮細胞のviabilityの維持ならびに，尿細管形態形成に関わるproHB-EGFの役割を明らかにした。NRKproHB-EGFは，高密度 (1×105 cells/Φ1.5cm well) での無血清培養，細胞接着阻害培地 (polyHEMA dish，GRGDTP添加) ならびにH2O2の暴露による細胞障害実験において，コントロール (wildおよびneo) と比較して有意なcell viabilityを示すとともにapoptosisを抑制した。これらの所見は，低密度での培養ならびに中和抗体の添加により抑制された。EGF受容体陽性A431細胞をacceptorとし，NRKproHB-EGFをdonor細胞としたjuxtacrine activity assayで，NRKproHB-EGFはコントロールと比較して高度なreceptor phosphorylationを誘導した。また，NRKproHB-EGFは無刺激下で，type I，III collagen mRNAの著明な発現を示した。胎生ラットの腎組織では，HB-EGF蛋白は尿管芽に局在しており，またmRNAレベルでも強い発現を認めた。NRKproHB-EGFでの検討では，phorbor esterの添加により，膜結合型HB-EGFの可溶性部分を切断して無血清培地に継代した時のみ，約12∼24時間の経過でNRKproHB-EGFはbranchingを開始し，最終的に尿細管類似の構造を呈した。一方，FCS添加培地での培養やコントロールではこれらの変化は認めなかった。これらの成績から，proHB-EGFは，主としてjuxtacrineを介したcell to cell interactionの増強とcell to matrix interactionの強化により細胞生命維持を促進しており，また種々な成長因子の影響が少ないと考えられる無血清培地でbranchingが認められたことや胎生ラットでの成績から，HB-EGFは尿細管の形態形成にも関与している可能性がある。
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