ヒト唾液の糖含有量の高い糖タンパク画分の分離とそのレクチンに対する親和性

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ヒト唾液に存在する糖含有量の高い糖タンパク画分の構造と, その機能に関する研究は極めて少ない。私達は既に, ヒト耳下腺唾液よりこの糖タンパク画分を純化し, その糖鎖構造を解析したところ, 糖鎖中にα1→2マンノシド結合をもち, 非還元末端に, フコースα1→2ガラクトースβ1→3 or 4N-アセチルグルコサミンの存在を確認した。一方, コンカナバリンA (Con A) は, α-マンノースに強い親和性をもつことから, この糖タンパクもCon Aと結合することが, その構造から推察される。そこで, この事実を実験的に確認するとともに, 抗A, 抗B血清およびレクチンHとの結合性についても血球凝集阻止反応により追究した。<BR>ヒト耳下腺唾液は, 9名の健康な成人より氷冷下で耳下腺開口部より直接採取した。この試料をセファデックスG-200により分画したところ, 抗A, 抗B血清およびレクチンHに強い反応をもつ糖タンパク画分, 糖の含有量が高く, レクチンHのみに反応する糖タンパク画分とさらに, 抗A, 抗B血清およびレクチンHのいずれにも反応しない殆んどタンパクのみの画分の3画分が得られた。この糖の含有量が高い糖タンパクの一部を, ConA-セファロースカラムに吸着させたところ, 非吸着画分に糖タンパクは認められず, 強い親和性を示すことが判明した。さらに吸着した糖タンパクは, α-マンノピラノシドにより脱着された。この性質は, ABO式血液型のいずれの血液型においても同じであった。さらに, この糖タンパクの精製標品を電気泳動したところ, Cationicな電気泳動において, 1つの不鮮明なバンドとして認められた。以上のことから, 糖含有量の高い糖タンパクは, Con A-セファロースにより効果的に, ほぼ単一に取り出された。なお, この精製標品はレクチンHに結合することが示された。<BR>構成糖について調べてみると, 血液型による差異はなく, フコース: マンノース: ガラクトース: N-アセチルグルコサミンの相対比は, 2: 3: 3: 4であった。<BR>本研究は, 唾液糖タンパクのなかでも, 糖含有量の高い糖タンパク画分を, Con A-セファロースァフィニティカラムを応用して, 効果的に分離できることを示し, この糖タンパクはCon Aのみでなく, レクチンHに対しても強い親和性をもつことから, フコースα1→2ガラクトースβ1→3 or 4N-アセチルグルコサミンの構造が存在することを間接的に明らかにした。
有限責任中間法人日本口腔衛生学会の論文

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