食品の鮮度測定法に関する研究-X : 太田氏のヒスタミン定量法の誤差について
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概要
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The chemical estimate of fish freshness is not always in accord with the organoleptic observation. TOMIYAMA et al1) showed that the histamine (Hm) content of sardine flesh ran parallel with the organoleptic grade. A prerequisite for the study on the applicability of this objective test to judge quality of mackerel is to devise an appropriate practical method for the determination. OTA4) reported a practical method in which he employed p-nitrobenzene diazonium ion (p-NBD) as diazotizing reagent and ethyl acetate as extractant of Hm azo-pigment. However, when Hm determination of mackerel flesh was made by this method in our laboratory, it was found that high Hm values were always obtained on fresh fish extract and that the absorption spectrum of the Hm azo-pigment from a pure Hm solution was different from that prepared from Hm in the presence of flesh extract. The present paper deals with the improvement of the OTAs method by removing interfering substances with Amberlite IRA-400 (OH-form) and introducing nitrous acid treatment prior to diazotization. Data herein presented revealed that (1) a maximal formation of the Hm pigment occurs at a pH range of 9 to 9.5, (2) the determination is greatly interfered by the presence of various amino acids in flesh extract and mechanism of the interference involved is due to consumption of p-NBD by amino acids giving an orange pigment, and (3) the interfering substances can be eliminated by percolating a trichloracetic acid extract of sample flesh through Amberlite IRA-400 (OH-form) leaving Hm in effluent, histamine being adsorbed on Amberlite IRC-50 and eluted with 0.2 N HC1, followed by the nitrous acid treatment and coupling with p-NBD.
- 公益社団法人 日本水産学会の論文
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