ウシ体外受精由来胚の胚盤胞への発育に関する合成培地の検討

概要

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ウシ核移植による再構築胚の発育効率を改善することを目的として,TCM-199およびCRlaaの2種類の培地を用い,媒精後1日目の卵丘細胞を除去したウシ体外受精由来胚の胚盤胞への発育率を比較検討した.<BR>卵巣より卵胞卵子を吸引採取し,常法の体外成熟ならびに体外受精を行った.0.1%ヒアルロニダーゼPBS(一)溶液で媒精後14~16時間目に卵丘細胞を除去し,CRlaaおよびTCM-1 99培地を,血清と卵管上皮細胞の有無により,6区に分けて媒精後8日目まで培養した.各区の構成はCRlaaおよびTCM-199培地ともに血清無添加の区,5%子牛血清を添加する区,5%子牛血清およびウシ卵管上皮細胞を添加する区の3つの区とした.7日目の胚盤胞率とその形態的評価,8日目の拡張胚盤胞率を各区間で比較検討した.胚盤胞への発育率はCRlaaの血清添加区と血清および卵管上皮細胞添加区が,それぞれ24.1%および22.1%で他区に比べて有意に高い値を示した(P<0.05).拡張胚盤胞への発育率および胚盤胞の形態的評価についても同様の傾向が認められた.また,胚盤胞率の高かったCRlaaの血清添加区と血清および卵管上皮細胞添加区での平均細胞数はそれぞれ100.1±27.7個および97.2±31.4個であり有意な差は認められなかった.<BR>以上の結果より,CRlaaはウシ胚の胚盤胞への発育に対して,血清成分を必要とすることならびに血清添加すれば,卵管上皮細胞と共培養した場合と比べて差のない発育効果のあることが明らかになった.
日本繁殖生物学会の論文

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