ラット肥満細胞リン酸化反応に関する研究(第6報) : ―顆粒膜Cyclic AMP依存性タンパクリン酸化反応―
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概要
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ラット肥満細胞を細胞破さい装置により破さいした後Percoll比重法により顆粒を分離した．膜を欠き膨満した形態を示すいわゆる破損顆粒を，Mg<SUP>2+</SUP>の存在下に外因性protein kinaseおよびタンパク基質を加えることなく[γ<SUP>32</SUP>P]ATPと反応させ，SDS/PAG電気泳動を行うと，分子量44,000のポリペプチドがリン酸化した．この反応はATP，Mg<SUP>2+</SUP>に依存し，1 mM Mg<SUP>2+</SUP>で最大の反応がみられた．反応は急速で，至適反応温度は30°C であった．0.05〜0.5 μM cyclic AMPは本タンパクリン酸化反応を刺激し，0.45mM CaCl<SUB>2</SUB>は抑制的に作用した．phosphatidylserineおよびphorbol ester TPAは影響しなかった．分子量44,000のポリペプチドはアイソエレクトリックポイント6.6〜7.6で数個の成分より構成されていた．以上より，肥満細胞顆粒にはいわゆる内因性cyclic AMP依存性タンパクリン酸化能が存在することが明らかになった．
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